Producción de anticuerpos de yema de huevo específicos para virus, para el diagnóstico de la enfermedad de Newcastle, bronquitis infecciosa y enfermedad de Gumboro, mediante la técnica de inmunofluorescencia directa de anticuerpos

Resumen

Se examinó la posibilidad de utilización de anticuerpos de yema de huevo (IgY) para la detección del virus de la enfermedad de Newcastle (NDV), el virus de la bronquitis infecciosa (IBV) y el virus de la enfermedad de Gumboro (IBDV), mediante la prueba de inmunofluorescencia directa de anticuerpos. Se inmunizaron gallinas ponedoras con vacunas comerciales, conteniendo NDV, IBV y IBDV inactivados. Se detectaron altos títulos de anticuerpos de yema de huevo específicamente antivirales, de 4 a 8 semanas después de la inmunización inicial, durante un período de alrededor de 20 semanas. La IgY se precipitó a partir de la yema, con sulfato de amonio y se purificó seguidamente mediante cromatografía de afinidad, alcanzando un promedio de 1,46 mg de IgY específica por yema. Después de marcar con isotiocianato-fluoresceína (FITC), se evaluó la sensitividad y la especificidad de los conjugados en cultivos celulares. Durante el test de inmuno-fluorescencia directa de anticuerpos, los conjugados diluidos a 1:4 y 1:8 en PBS reaccionaron específicamente con los antígenos homólogos en frotis preparados a partir de órganos de pollos infectados experimentalmente y en cultivos celulares. No se presentaron reacciones con antígenos heterólogos y la fluorescencia no específica se suprimió exitosamente mediante absorción de conjugados con polvo de hígado. Se concluye que los anticuerpos de yema de huevo marcados con FITC pueden producirse en larga escala, de manera simple y económica y por lo tanto representan una alternativa interesante a la práctica usual de producción de anticuerpos fluorescentes para el diagnóstico de NDV, IBV y IBDV, a partir de suero de pollos o conejos, particularmente en laboratorios con recursos financieros limitados.