Detección de anticuerpos de Cowdria ruminantium en el suero de rumiantes domésticos mediante el ELISA indirecto

Resumen

Se desarrolló una fase sólida de inmunoensayo enzimático para la detección de anticuerpos de Cowdria ruminantium, en el suero de rumiantes domésticos. Como antígeno se usaron cultivos de microorganismos en células de endotelio umbilical bovino. Cuando se alcanzó una lísis de 90 % en el cultivo, se centrifugó el sobrenadante, se trató por ultrasonido y se cubrió con poliestireno en placas de microtitulación. Los anticuerpos se detectaron 9 días después de la inmunización experimental de las cabras. La sensibilidad del ELISA, calculada con 73 sueros de rumiantes, se localizó en un intervalo de 97,3 a 98,6 %. La especificidad general del test fue de 97 % (N = 2925). Sin embargo la especificidad fue inferior para las ovejas (94,4 %, N = 881) que para las cabras (98,6%, N = 651) y los bovinos (97,8 %, N = 393). Las reacciones cruzadas, que podrían explicar algunos de los falsos positivos, se dieron entre el antígeno de Cowdria y los sueros preparados contra Ehrlichia bovis (1 bovino positivo de cada 2 inoculados) o E. ovina (2 ovejas de cada 2 inoculadas fueron positivas), pero no contra E. phagocytophila. Los ensayos de variabilidad intra-test y inter-test fueron de 7,5 % y 7,8 % respectivamente, indicando una buena reproductibilidad del ELISA.