Mejoramiento de la reproducción del test ELISA adaptado a la detección de anticuerpos anti-Trypanosoma congolense en bovinos

Resumen

La posibilidad de simplificar y automatizar el test ELISA, lo convierten en un instrumento eficaz para la detección de anticuerpos y de antígenos. Sin embargo, la reproducción de los resultados presenta generalmente problemas, ocasionados por razones multiples. Se buscó mejorar la repetición del test ELISA en un sistema de detección de anticuerpos anti- Trypanosoma congolense en los bovinos. Los tampones fueron siempre utilizados a temperatura ambiente para evitar los gradientes de temperatura. Todos los volúmenes fueron de 200 µl por pozo. El uso de suero decomplementado de conejo permitió reducir la fricción de fondo, mediante la saturación de los sitios inespecíficos. El uso de T. congolense como antígeno homólogo dió resultados ligeramente superiores a los de un antígeno heterólogo (T. evansi). Para cada nueva preparación de antígeno debe ¡realizarse la titulación de la concentración de antígeno a utilizar. Existe la posibilidad de probar cada suero cuatro veces en una misma placa, lo que permite obtener una mediana y una desviación estandar. Finalmente, la lectura no se hace a partir de la duración del momento de contacto entre la enzima y el sustrato, sino del avance real de la reacción gracias a un suero control. Los resultados muestran una excelente reproductibilidad, siendo recomendable el uso de computadores.