Aplicación de la reacción de la polimerización en cadena al diagnóstico directo de la clamidiósis abortiva (Chlamydophila abortus y Chlamydophila pecorum) de los pequeños rumiantes en Marruecos

Resumen

Con el fin de mejorar el diagnóstico directo de la clamidiósis abortiva de los pequeños rumiantes, se obtuvieron 225 frotis vaginales de ovejas y de cabras que habían abortado y se examinaron para la búsqueda de ADN de Chlamydophila, utilizando dos tipos de PCR, un PCR (CTU/CTL) específico de Clamidiales y un PCR (CPS/CPC) específico de las especias Chlamydophila abortus y Cp. pecorum. El gen omp1 codificante para la proteína mayor de la membrana externa de los Clamidiales fue detectado por la PCR (CTU/CTL) en 65 muestras (29%) de las recolectadas y analizadas, de las cuales 80% fueron realizadas en un lapso inferior a cuatro semanas post aborto. La mayoría de las muestras positivas para PCR (CTU/CTL) (69%) provenían de hatos reconocidos como positivos mediante el test de fijación de complemento. La PCR específica de especie, aplicada a las muestras positivas para PCR (CTU/CTL), no permitió la detección de los fragmentos esperados de Cp. abortus (1800 pb) y de Cp. pecorum (580 pb), sino en cuatro de las 65 muestras examinadas. Las otras muestras fueron negativas (63%) o no concluyentes (31%) con bandas no específicas de tamaños intermedios. La restricción enzimática de los productos de amplificación (PCR-CTU/CTL) reveló una gran diversidad genética entre las 65 muestras estudiadas. Solo 15 muestras mostraron un perfil de digestión típico de Cp. abortus, pero el resto de las muestras (77%) mostró perfiles de Cp. pecorum o próximos de esta especie. El cultivo de las células de McCoy de 26 frotis vaginales y productos de abortos provenientes de animales que abortaron y confirmados positivos para la clamidiósis (serología y PCR), reveló la presencia de Chlamydophila en ocho muestras, de las cuáles siete fueron caracterizadas como tipo Cp. abortus y uno de tipo Cp. pecorum. Las muestras restantes no produjeron ningún efecto cito patogénico después de cinco pasajes sucesivos o bien estaban contaminadas. Otros estudios fueron llevados sobre la cepa Cp. pecorum, designada M14, aislada por la primera vez en Marruecos, para probar su virulencia en el ratón. Los resultados sugieren una variabilidad genética de las cepas abortivas y una asociación de Cp. pecorum a los abortos en los ovinos y los caprinos en Marruecos. Esta diversidad genética amerita ser más estudiada para orientar las estrategias de vacunación contra la clamidiósis abortiva en Marruecos.