Caracterización de anticuerpos monoclonales dirigidos contra los virus de la peste bovina y de la peste de los pequeños rumiantes: identificación de epítopes conservados o de especificidad estricta sobre la núcleo proteína

Resumen

Se caracterizaron veintinueve anticuerpos monoclonales (AcM) dirigidos contra las cepas virales vaccinales RPV-RBOK y RPVL de peste bovina (RPV) y de la cepa PPRV NIG 75/3 de la peste de los pequeños rumiantes (PPRV), mediante radio inmunoprecipitación (RIPA), inmunofluorescencia (IFI) y immunoenzimología (ELISA). Veintisiete de éstos estaban dirigidos contra la nucleoproteína (N); dos AcM fueron específicos a la proteína de fusión (F) y la proteína de la matriz (M) del virus homólogo. Para aquellos que no fueron precipitantes, la reactividad con respecto a la proteína de estructura se confirmó mediante IFI y ELISA. La reactividad con IFI de estos AcM permitió clasificar las cepas de RPV y PPRV de diferente origen geográfico y compararlas con dos otros morbilivirus, rubiola (MV) y enfermedad de Carré (CDV). La AcM dirigida contra la M no presentó variaciones epitópicas dentro de las cepas PPRV y la AcM anti F1 resultó un sitio único sobre el conjunto de las cepas RPV y PPRV, al tiempo que se diferenció la MV y de la CDV. Las AcM anti-N se purificaron, biotinilaron y analizaron mediante competencia recíproca, con respecto a las cepas RPV-RBOK y PPRV-NIG 75/1 utilizadas como antígenos de ELISA. Estos definieron sobre la núcleo proteína de estos virus respectivamente 6 y 7 sitios antigénicos. Sobre el total de los sitios delimitados, algunos fueron unicamente RPV (2 sitios), otros PPRV (3 sitios). Las AcM que los reconocieron permitieron distinguir los dos virus sin ambigúidad. Cuatro sitios que se intercalaron sobre los virus RPV y PPRV, se conservaron sobre el conjunto de los morbilivirus y los sitios restantes fueron comunes al menos a 2 morbilivirus. Tres AcM caracterizados en este estudio fueron buenos candidatos para las pruebas de diagnóstico diferencial (Libeau G. et coll., 1994, Vet. Rec., 134: 300-304 ; Libeau G. et coll., 1995, Res. vet. Sci., 58: 50-55).