Extraction et purification de l'ARN total de tissus de banane (à petite échelle)
DOI :
https://doi.org/10.1051/fruits:2008020Mots-clés
BANANE, MUSA, ARN, PURIFICATION, EXTRACTION, PULPE DE FRUITS, TISSU VEGETAL, PCRSujets
F30 - Génétique et amélioration des plantes
Résumé
Introduction. Le protocole vise à préparer de l'ARN total pour l'étude de l'expression de gènes par les techniques de Northern Blots, de Reverse Transcription PCR, et de PCR quantitative en temps réel ; pour l'isolement de cDNA par Reverse Transcription PCR ; pour la construction de bibliothèque de cDNA. Le principe, les principaux avantages, le matériel végétal requis, le temps nécessaire à l'obtention de l'ARN total et les résultats escomptés sont présentés. Matériel et méthodes. Cette partie décrit le matériel et les 27 étapes nécessaires pour préparer l'ARN à partir de tissus de peau et de pulpe de banane : préparation de la poudre de tissus végétaux, préparation du tampon d'extraction de l'ARN total, isolement de l'ARN à partir du tissu de banane broyé. Résultats. L'extraction de l'ARN total par la méthode décrite permet de réaliser son électrophorèse avec un gel à base de formaldéhyde comme dénaturant et sa transcription réverse in vitro. Un exemple d'application de Northern Blots est donné.Téléchargements
Publié
2008-01-01
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