Improving pineapple micropropagation protocol through explant size and medium composition manipulation

Résumé

Bien que plusieurs protocoles de micropropagation d'ananas aient déjà été publiés, une amélioration significative pourrait être réalisée si les étapes de la culture in vitro étaient mieux définies. Nos travaux ont porté sur plusieurs expérimentations visant la fabrication en série de plantules de haute qualité. Des bourgeons axillaires ont été inoculés sur un milieu de culture MS liquide additionné d'ANA (2 µM) et de BAP (4 µM). Les pousses régénérées, réparties en trois classes de tailles différentes, ont alors été utilisées pour d'autres expérimentations. Elles ont d'abord été mises en culture dans des flacons contenant le même milieu de culture MS avec ou sans régulateurs de croissance. Puis quatre milieux de base, contenant des sels différents et exempts de régulateurs de croissance, ont été testés. Dans une troisième analyse, le milieu de culture MS a été comparé à un milieu MS dilué de moitié pour étudier l'étape d'élongation et d'enracinement des plantules. Sur le milieu de culture MS, complété d'ANA et de BAP, le taux de multiplication le plus élevé (13,5 pousses) a été obtenu avec les plus petites pousses mises en culture, alors que, sur le milieu de culture MS sans régulateurs de croissance, les plantules les plus hautes (7,7 cm) ont été issues des plus hautes pousses mises en culture; elles n'ont montré aucune vitrification. Le milieu de culture MS normal, comparé à celui dilué de moitié et aux trois autres formulations de sel, a provoqué une augmentation significative de l'élongation des plantules et un meilleur état général de celles-ci. Pour l'acclimatation, les taux de survie les plus forts (93,8%) et les poids frais et secs les plus élevés ont été obtenus à partir du transfert des vitroplants mesurant plus de 7,0 cm. En utilisant le protocole décrit dans ce travail, il est possible d'obtenir 1 million de plantules en 9 mois, à partir d'un seul bourgeon, avec un intervalle de 45 j entre repiquages successifs et un taux de multiplication de 10 pousses par bourgeon