A critical study of the technique of flow cytometry applied to plant breeding : results achieved for some citrus species

Abstract

La cytométrie en flux est une méthode d'analyse de cellules ou de noyaux isolés, entraînés par un flux liquide. Cette technique permet, dans des conditions expérimentales données, des mesures de volume et de fluorescence. Quand le marquage fluorescent réalisé est spécifique d'une substance (ADN par ex.), une analyse quantitative peut être envisagée. La rapidité d'analyse (10@4 à 10@6 évènements/mn), la possibilité de tri cellulaire en conditions vitales, la détermination dans une population donnée de la distribution d'un paramètre étudié (quantité d'ADN, quantité d'ARN) enfin le pouvoir de réaliser une analyse multiparamétrique sont les atouts majeurs de cette technique. 2 types de résultats peuvent être obtenus de façon fiable. 1- Le niveau de ploïdie d'un échantillon donné peut être rapidement révélé. 2- La taille relative du génome d'une série de génotypes, d'espèces, de genres ou de familles peut être appréciée et comparée. L'analyse d'une soixantaine d'agrumes de la collection de Corse a permis de confirmer la diploïdie de la quasi-totalité des Citrus, Poncirus, Fortunella, Microcitrus et Eremocitrus envisagés. Toutefois, trois Poncirus tétraploïdes ont été identifiés et la triploïdie du limettier Tahiti a été vérifiée. Il semble, par ailleurs, exister une variation de la taille du génome entre certaines espèces du genre Citrus ainsi qu'entre les espèces du genre Citropis